产品信息
产品简介
PI,即碘化丙啶,是一种溴化乙啶的类似物,能够与DNA强力结合,它在嵌入双链DNA后释放红色荧光,实现对DNA或细胞核的染色。PI不能穿透完整细胞膜,但能穿透凋亡晚期细胞及死细胞的破损细胞膜,利用该特点,PI通常与Calcein-AM或FDA等荧光探针联合使用,进行活死细胞染色及观察,或采用流式细胞仪相对定量检测细胞凋亡(apoptosis)及细胞周期。PI-双链DNA复合物的最大激发波长为535nm,最大发射波长为615nm。
本产品PI染色液为即用型,PI浓度为100 μg/mL,可直接用于坏死细胞或组织的细胞核染色,以及细胞悬液用此染液染色后可以用于流式细胞仪检测细胞周期。
储存与运输
冰袋(wet ice)运输;2-8℃避光保存,有效期6个月。
组成
Component | G1021-10ML |
PI染液 | 10 mL |
说明书 | 1份 |
使用方法
l 流式细胞仪检测细胞周期操作步骤:
1. 培养好的活细胞经消化、PBS洗涤、低速离心收集得到细胞沉淀。
2. 向细胞沉淀中缓慢加入1-3 mL -20℃预冷的90%乙醇,重悬细胞,冰浴过夜。
3. 1500转离心5min收集细胞,以PBS重悬,再次离心,去除上清液。
4. 加入250 μL PBS重悬细胞。
5. 加入2 μL浓度为1 mg/mL的RNase A(推荐G3405),37℃水浴40 min。
6. 加入50 µL PI染液,避光孵育20 min(时间可根据实验材料的染色结果调整)。
7. 流式细胞仪检测。
l 荧光显微镜观察活死细胞操作步骤:
1. 培养好的贴壁细胞,去除培养基,用PBS清洗2次。
2. 将PI染液用PBS稀释10-20倍,配制成至终浓度为5-10 μg/mL的PI染色工作液。向孔板内加入适量PI染色工作液覆盖细胞,室温避光孵育5-10 min。
3. 弃去染色工作,加入PBS覆盖细胞,荧光显微镜观察。死细胞或凋亡晚期细胞的核呈红色荧光。
注意事项
1. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
2. 按照10倍稀释配制工作液,每个样本滴加0.2 mL工作液,本产品大约可用于500次染色。
3. 操作时请穿实验服,并佩戴一次性手套。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
货号 | 名称 | 标记物 | 特点 | 染色后固定 | 染色后破膜 | 染色前固定 | 细胞毒性 | 染色稳定性(活细胞) |
G1127-1ML | Hoechst 33342染色液(1 mg/mL) | 细胞核 | 适用于活细胞&固定细胞的染色,染色后可以固定可以破膜。无细胞毒性。 Hoechst 33342的细胞膜透性比Hoechst 33258更好。 Hoechst 33258的水溶性比Hoechst 33342更好。 | 可以 | 可以 | 可以 | 无 | —— |
G1011-10ML | Hoechst 33258染液(即用型) | 细胞核 | 可以 | 可以 | 可以 | 无 | —— |
G1012-10ML | DAPI染色试剂(即用型) | 细胞核 | 适用于活细胞&固定细胞的染色,染色后可以固定可以破膜。无细胞毒性 | 可以 | 可以 | 可以 | 无 | —— |
G1012-100ML | 细胞核 |
G1021-10ML | PI染液 | 细胞核 | 需要固定后再染色。适用于细胞,酵母,G+及G-细菌 | 不可以 | 不可以 | 可以 | 有一定毒性 | —— |
G1248-100T | IF488-鬼笔环肽 | 细胞骨架 | 需要固定后染色。适用于细胞,酵母,G+及G-细菌 | 不可以 | 不可以 | 必需固定 | 有 | —— |
G1249-100T | IF555-鬼笔环肽 | 细胞骨架 | 需要固定后染色。适用于细胞,酵母,G+及G-细菌 | 不可以 | 不可以 | 必需固定 | 有 | —— |
G1515-100T | JC-1线粒体膜电位检测试剂盒 | 线粒体 | 只能染活细胞,可以反应线粒体膜电位的变化。正常细胞呈现胞质绿色荧光,线粒体极化的细胞呈现胞质红色荧光 | 不可以 | 不可以 | 不能固定 | 无 | 数天 |
G1704 | DiO细胞膜绿色荧光染色试剂盒 | 细胞膜 |
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