产品信息

产品简介

Enterokinase（His tag）是来源于牛的肠激酶轻链，由毕赤酵母重组表达纯化，是一种高度特异性的丝氨酸蛋白酶，特异性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys（DDDDK）氨基酸序列并在序列的羧基端切割。本产品纯度高，不含核酸酶及其他蛋白酶活性，主要用于各种酶原活化、去除融合蛋白的标签肽段。其稳定性好，具有较宽的pH范围（pH 4.5-9.5）和较宽的温度范围（5-45℃），即使在多种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。

应用：酶原活化、蛋白融合标签去除；本产品带有His标签便于亲和去除。

来源：牛的肠激酶轻链基因，毕赤酵母重组表达，带His标签。

酶活定义：在25℃，pH 8.0条件下，16 h内可以将25 μg底物（含有Enterokinase酶切位点的蛋白）切割95%以上所需酶量为一个酶活单位。

失活或抑制：在>2 M Urea，>250 mM NaCl，>20 mM β-ME，>0.1% SDS，>50 mM imidazole条件下，会抑制酶活。

纯度及浓度：SDS-PAGE检测纯度≥95%，10 U/μL。

Recombinant Enterokinase存储液：20 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 2 mM CaCl₂, 50% Glycerol, pH 7.2。

10×EK Buffer：200 mM Tris-HCl, 500 mM NaCl, 20 mM CaCl₂, pH 8.0。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。

组成

操作步骤

1. 将25 μg蛋白底物置于反应缓冲液（建议反应缓冲液：20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl₂, pH 8.0）中，总体系20 μL（根据需要补加无酶水）；

2. 向上述体系中加入1 μL Recombinant Enterokinase，于25℃孵育16 h即可（孵育时间可以进行适当摸索，反应温度也可进行适当调整）；

3. 如果需要去除体系中的Enterokinase，可以通过镍柱亲和纯化去除；

注意事项

1. 酶制品使用时应放在冰盒内或冰浴，使用完毕后应立即放置于-20℃保存，建议分装保存；

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）