产品信息

产品描述

大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导完全培养基适用于大鼠骨髓间充质干细胞诱导成骨分化，产品已包含大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导生长所需的各种成分，无需添加其它成分，可直接用于大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化。

储存与运输

冷藏运输，2-8 ℃避光保存，有效期三个月。

产品组成

产品使用

1. 在无菌的条件下取500 µL多聚赖氨酸溶液吸入12孔板中（不建议使用爬片，诱导后的细胞易卷边，飘起）。

2. 置于37 ℃培养箱孵育过夜，吸除多聚赖氨酸溶液，PBS清洗2遍。

3. 将待诱导的大鼠骨髓间充质干细胞按照1×10⁵ cells/孔的细胞密度接种于包被过的12孔板中（建议使用5代以内的细胞）。

4. 细胞置于37 ℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养。

5. 待细胞汇合度达到80%时，小心地将孔内完全培养基吸走。

6. 向孔内缓慢加入恢复室温后的1 mL大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导完全培养基（遇冷会导致细胞收缩，飘起）。

7. 诱导每隔2-3天后换一次液，吸弃孔板中的培养液（遗留少量培养液）。

8. 加入1 mL新鲜的大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导完全培养基（加液过程轻柔缓慢）。

9. 诱导14-21天左右，每天观察细胞状态。

10. 直至出现大小明显的钙结节，即可结束诱导（每次观察时间不超过10 min，拿取过程中切勿晃动）。

11. 吸弃孔板内的培养基，缓慢加入恢复室温后的PBS清洗1-2遍。

12. 加入500 µL4%的多聚甲醛溶液，固定30 min。

13. 吸弃4%的多聚甲醛溶液，用PBS清洗1-2遍。

14. 每孔加入1 mL茜素红染色液，室温染色30 min。

15. 吸弃茜素红染色液，用PBS清洗1-2次。

16. 加入少量PBS即可在显微镜下拍照。

注意事项

1. 收到培养基时，请及时检查外包装是否完好，是否损坏、漏液，如有请尽快联系。

2. 本产品不易将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。

3. 本产品保质期三个月，请于保质期内使用。

4. 请严格执行无菌操作，避免污染。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！