| 产品名称 | 产品编号 | 规格 |
|---|---|---|
| RNASweAMI™ 原位杂交DAB检测试剂盒 | BKM-6875 | （DAB）50 T |
原位杂交试剂盒订购，请下载RNASweAMI原位杂交试剂盒订购信息表
GF001-50T RNASweAMITM 原位杂交DAB检测试剂盒组成及储存条件
Component No. | Component name | 50T Sizec | Storaged |
GP-####-1a | Target Probe-[species]-[gene]-Mix1 | 650 μL | -20℃ |
GP-####-2a | Target Probe-[species]-[gene]-Mix2 | 650 μL | -20℃ |
G3701-25UL | DIG probe（200×） | 25 μL | -20℃ |
G3702-15UL | anti-DIG (HRP) | 15 μL | -20℃ |
G3708-100ML | 固定液 | 100 mL | 4℃ |
G3709-50ML | 修复液（20×） | 50 mL | 4℃ |
G3710-1ML | Proteinase K | 1 mL | -20℃ |
G3711-20ML | 通透剂b | 20 mL | 4℃ |
G3712-50ML | 杂交液 | 50 mL | 4℃ |
G3713-100ML | 20×SSC | 300 mL | 4℃ |
G3716-10ML | 封闭液 | 10 mL | 4℃ |
G3717-100UL | DAB显色剂A | 100 μL | 4℃ |
G3718-10ML | DAB显色剂B | 10 mL | 4℃ |
a靶标探针货号中#####为每一个探针的唯一数字编码，种属简称：Mm=mouse，Hs=human，Rn=rat，Oc=Rabbit，Bt=Bovine，Dr=zebrafish。
b通透剂有效成分为0.5% Triton X-100，针对不同的细胞可进行调整，如需更低浓度的Triton X-100通透处理细胞，可用无核酸酶的1×PBS对通透剂进行稀释后使用。
c整套试剂可以用于检测50个面积约为20 mm×20 mm的组织点，当用于检测的样本面积较大时，每套试剂能完成的实验次数会相应减少。
d所有试剂在存储条件下有效期12个月，整个试剂盒冰袋低温运输。
RNASweAMI原位杂交简介
原位杂交（In situ hybridization），即ISH技术，基本原理是基于碱基互补配对原则，利用特定标记（如荧光素、地高辛等）的已知序列单链核酸作为探针，与待检测的细胞或组织切片中的靶基因（DNA或RNA）特异性结合，二者经碱基互补配对，形成靶基因与标记探针的杂交体。随后根据探针的标记物，利用不同的显色系统对杂交体进行显色及信号放大，从而对靶基因进行精确定量定位。根据探针的标记物不同，有荧光显色系统、DAB显色系统等。
RNASweAMI ISH原位杂交技术检测流程如图1所示，特异性的寡核苷酸探针通过碱基互补配对原则与组织样本中的靶标RNA杂交，然后通过两个“L”型结构（单链DNA）使得靶标处富集大量的信号探针，实现级联式信号放大，经明场或者荧光成像技术，可观察到靶标RNA处形成的明显点状或团簇状信号。相比于传统的原位杂交直标方法，该方法理论上可以将信号放大400-8000倍，实现单分子RNA的可视化，且具有很高信噪比。
本手册提供使用RNASweAMI原位杂交实验所需的特异性靶标探针（根据用户指定的基因提前设计及合成），地高辛标记的信号探针以及DAB信号检测试剂盒的指南和实验方案。
表 1
材料名称 | 推荐供应商或试剂级别或特征 | 货号 |
双氧水（30% H2O2） | 分析纯 | —— |
无水乙醇 | 分析纯 | —— |
二甲苯 | 分析纯 | —— |
中性树胶 | Servicebio | WG10004160 |
超净快干封片胶 | Servicebio | G1404 |
苏木素染液 | Servicebio | G1004 |
苏木素分化液 | Servicebio | G1039 |
苏木素返蓝液 | Servicebio | G1040 |
1×PBS，无核酸酶 | Servicebio | G4202 |
无核酸酶水 | Servicebio | G4700 |
抗原修复盒 | Servicebio | WGXFHA0008 |
24片染色架/载玻片架 | Servicebio | WG493-24 |
免疫组化笔 | Servicebio | G6100 |
湿盒 | Servicebio | WG525 |
无酶离心管（各种规格） | Servicebio | |
无酶吸头（各种规格） | Servicebio | |
杂交仪 | —— | —— |
水浴锅 | 可维持室温至100±1℃ | |
经RNase灭活处理的器皿* | 玻璃烧杯，玻璃瓶 | —— |
*重要：所有用于原位
扫码关注 更多精彩
在线客服
