产品名称 | 产品编号 | 规格 |
---|---|---|
总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽 T-GSH/GSSG | BKM-6938 | (CAT)反应 |
实验图:
服务介绍:
谷胱甘肽(Glutataione)的缩写,又有名词解释为媚力肽GSH。媚力肽GSH为解除毒素的特效物质,是一种由三个氨基酸组成的小分子肽,它作为体内重要的抗氧化剂和自由基清除剂,如与自由基、重金属等结合,从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质,排泄出体外。测定生物样品中,特别是血清(浆)中还原型和氧化型谷胱甘肽(GSH和GSSG)含量变化,是机体氧化物牵累的重要指标。
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
GM1140 | 总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽 T-GSH/GSSG | 反应 | 10(单指标) |
总谷胱甘肽T-GSH和GSSG氧化型谷胱甘肽 为2个指标,测其中一个10元/样/指标,2个指标都测20元/样。
实验结果展示:
1、总谷胱甘肽T-GSH
2、氧化型谷胱甘肽GSSG
实验流程:
1. 总谷胱甘肽(T-GSH)检测:
1.1. 对总谷胱甘肽检测样品进行如下处理(可选,如果需要检测GSSG含量,并计算GSH含量,建议此处进行处理);
标准管 | 空白管 | 样品管 | |
谷胱甘肽标准品 | 50 μL | ||
PBS或水 | 5 μL | 55 μL | 5 μL |
待测样品 | 50 μL | ||
震荡混匀,室温孵育1 h |
1.2. 参考下表进行总谷胱甘肽检测;
标准管 | 空白管 | 样品管 | |
谷胱甘肽标准品 | 20 μL | ||
PBS或水 | 20 μL | ||
待测样品 | 20 μL | ||
谷胱甘肽检测工作液 | 160 μL | 160 μL | 160 μL |
混匀孵育5 min | |||
底物 | 20 μL | 20 μL | 20 μL |
震板1 min,室温(25℃)孵育20 min,使用酶标仪检测412 nm处吸光度 |
2. 氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测:
2.1. 参考下表对还原型谷胱甘肽进行清除处理;
标准管 | 空白管 | 样品管 | |
谷胱甘肽标准品 | 50 μL | ||
PBS或水 | 50 μL | ||
待测样品 | 50 μL | ||
GSH清除剂 | 5 μL | 5 μL | 5 μL |
震荡混匀,室温孵育1 h |
2.2. 参考下表对氧化型谷胱甘肽进行检测
标准管 | 空白管 | 样品管 | |
谷胱甘肽标准品 | 20 μL | ||
PBS或水 | 20 μL | ||
待测样品 | 20 μL | ||
谷胱甘肽检测工作液 | 160 μL | 160 μL | 160 μL |
混匀孵育5 min | |||
底物 | 20 μL | 20 μL | 20 μL |
震板1 min,室温(25℃)孵育20 min,使用酶标仪检测412 nm处吸光度 |
3. 数据分析:
3.1. 标准曲线法:
3.1.1. 根据梯度稀释的标准组值-空白组值数据使用Excel等软件绘制T-GSH和GSSG标准曲线:
Y1=a1 X1+ b1和:Y2=a2 X2+ b2;
3.1.2. 血液样品T-GSH和GSSG含量计算:
3.1.3. 组织样品T-GSH和GSSG含量计算:
3.1.4. 细胞样品T-GSH和GSSG含量计算:
注意:还原型谷胱甘肽含量(μmol/L)= 总谷胱甘肽含量(μmol/L)- 2×氧化型谷胱甘肽(μmol/L)
注解:Y1 和Y2分别为T-GSH和GSSG标准组OD值-空白组OD值;X1和X2分别为T-GSH和GSSG含量;a1和a2分别为T-GSH和GSSG标准曲线斜率;b1和b2分别为T-GSH和GSSG标准曲线截距;ΔA1和ΔA2分别为T-GSH和GSSG:样品组OD值-空白OD组值;5*为血清和蛋白去除试剂混合后稀释的倍数;2*为GSSG换算成GSH时,需要乘以2;V为匀浆裂解组织或细胞使用的蛋白去除试剂的体积(mL);m为组织湿重(g);n为细胞量(106个);f为稀释倍数。
样品以及前准备:
仅供科研用途,不可用于临床诊断!
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