产品信息

产品描述

铁是生物体内重要的金属元素之一，参与造血、氧气运输、增强免疫、某些酶合成与反应活性等多种生理活动。随着近些年铁死亡概念的提出，铁离子含量变化作为铁死亡的特性之一，也表明铁离子代谢过程与生物体的健康与疾病有着重要的关系。

本产品为总铁离子检测试剂盒（Total Iron Assay Kit），检测原理为样品在特殊条件下，铁离子被充分释放，并迅速被试剂中还原剂还原成亚铁离子。随后亚铁离子和检测探针结合，生成有色物质，并在一定浓度范围内，生成物质的颜色深浅和铁离子浓度成正比。

储存与运输

冰袋(wet ice)运输；2-8℃避光保存，6个月有效。

试剂盒组成

注意：产品规格以组织、细胞样品检测检测体系为准。

操作步骤

1. 样品准备：

1.1. 血浆、血清样品：用试剂盒中的总铁检测缓冲液以样品和缓冲液1比4比例充分混合(如有沉淀10000g离心后取上清检测),用于后续总铁离子检测；

1.2. 组织样品：请使用总铁检测缓冲液进行匀浆裂解，其中组织和匀浆液的比例为1比9即可（例如：30 mg比270 μL）；匀浆裂解后，4℃，10000 g离心10-15 min，取上清用于后续总铁离子的检测；

1.3. 细胞样品：细胞收集后，使用总铁检测缓冲液重悬细胞，大约每1 X 10⁷个细胞加300 μL匀浆液；匀浆裂解后，4℃，10000 g离心10-15 min，取上清用于后续总铁离子检测；

1.4. 铁离子标准品：使用总铁检测缓冲液将铁离子标准品（1 mmol/L）梯度稀释，例如取其50 μL加入到950μL超纯水中，稀释为50 μmol/L，并进一步梯度稀释做标准曲线，即50/25/12.5/6.25/3.125 μmol/L，与待测样品进行后续检测后，用于标准曲线法数据分析；或适当地稀释成一个已知浓度的标准品，与待测样品进行后续检测后，用于标准品换算法数据分析；

2. 总铁离子检测：

注意：血浆、血清样品与组织、细胞样品的检测体系和操作步骤有一定差异，因此作为参考的标准品需要在相应的体系以及步骤下进行检测，才能够进行对应的分析。

2.1. 血浆、血清样品检测——操作方式如下表所示；

2.2. 组织、细胞样品检测——操作方式如下表所示；

3. 数据分析：

注意：总铁检测缓冲液为特殊缓冲液，用其匀浆可使检测数据更加准确，但是会干扰BCA检测，如需蛋白浓度计算，请用同批样品另测浓度。

3.1. 标准曲线法：

3.1.1. 根据梯度稀释的标准组值-空白组值数据绘制标准曲线：Y=a X+ b(Y为标准组值-空白组值；X为铁离子标准品浓度；a为标准曲线斜率；b为标准曲线截距)；

3.1.2. 血清血浆样品总铁离子浓度计算：

3.1.3. 组织样品总铁离子浓度计算：

3.1.4. 细胞总铁离子浓度计算

3.2. 标准品换算法：

3.2.1. 单位血清血浆样品总铁离子浓度计算：

单位样品总铁离子浓度（μmol/L）=（样品组值-空白组值）/（标准组值-空白组值）×标准品总铁离子浓度（μmol/L）×样品稀释倍数

3.2.2. 组织、细胞样品总铁离子浓度计算：

组织样品总铁离子浓度（μmol/kg鲜重）=（样品组值-空白组值）/（标准组值-空白组值）×标准品总铁离子浓度（μmol/L）×样品稀释倍数×样品体积（L）/样品质量（kg）

3.2.3. 细胞样品总铁离子浓度计算：

细胞样品总铁离子浓度（μmol/10^6）=（样品组值-空白组值）/（标准组值-空白组值）×标准品总铁离子浓度（μmol/L）×样品稀释倍数×样品体积（L）/细胞量（10^6个）

注意事项

1. 使用前轻轻晃动各类试剂，确保各成分均匀条件下使用。

2. 标准品换算法分析数据时，需待测样品和标准品浓度处于试剂盒线性检测量程内；标准曲线法分析数据时，确保标准曲线R²＞0.99。

3. 避免使用铁制物品处理或转移样品。

4. 为了您的健康和安全，操作时请穿好实验服、戴好手套。

附录：技术参数

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！