产品信息

产品简介

本公司生产的全能核酸酶（Benzonase Nuclease），又称广谱核酸酶，是一种来源于粘质沙雷氏菌（Serratia Marcescen）的非特异性核酸内切酶。该内切酶可以在非常宽泛的条件下攻击并降解所有形式的DNA和RNA（单链、双链、线性、环化），在核酸链内任意位置进行切割，将核酸完全降解为3-5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸。工作pH范围为pH6-10，最适pH为8.0，工作温度范围为0-42℃，最适温度为37℃。全能核酸酶用途广泛，常用于重组蛋白、病毒疫苗等生物制品中去除核酸，可以有效降低细胞、组织、微生物等蛋白裂解液的粘度等。本产品没有His-tag。

酶活性定义：在37℃、pH 8.0反应条件下，2.625 mL反应体系中，在30 min内使△A₂₆₀吸收值变化1.0（相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸）所需酶量定义为一个酶活单位。

纯度：SDS-PAGE检测纯度≥95%，无蛋白酶，≥250 U/μL。

酶储存缓冲液：20 mM Tris-HCl，2 mM MgCl₂，2 mM NaCl，50% Glycerol，pH 8.0。

稀释缓冲液：20 mM Tris-HCl，2 mM MgCl₂，2 mM NaCl，pH 8.0。

图1. 全能核酸酶使用效果图。A，293细胞经RIPA裂解液裂解后，未加入全能核酸酶的样品基因组DNA大量释放呈粘稠状，而加入了全能核酸酶的样品由于释放的基因组DNA被降解不粘稠；B，在1 g大肠杆菌湿菌中加入5 mL RIPA裂解液混匀后，分别加入相应量的全能核酸酶（0、80、300 U/mL），室温处理30 min后拍照观察；C，分别取40 μg鲑鱼精DNA，加入相应量的全能核酸酶，于37℃孵育30 min后琼脂糖凝胶检测。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效。

组成

操作步骤

1. 用于降低细胞、组织或细菌裂解液的粘度：

细胞样本：a，贴壁细胞样品去除培养基后，再次用PBS清洗。每1 mL RIPA裂解液（推荐G2033、G2002）中加入1-2 μL全能核酸酶，然后按照裂解液的使用说明用于贴壁细胞的裂解。室温或冰上孵育5-30 min，收集裂解液，离心后取上清即可进行后续实验。b，悬浮细胞样品离心收集后，去上清。每1 mL RIPA裂解液（推荐G2033、G2002）中加入1-2 μL全能核酸酶，然后按照裂解液的使用说明用于悬浮细胞的裂解。室温或冰上孵育5-30 min，收集裂解液，离心后取上清即可进行后续实验。

组织样本：组织块用预冷PBS清洗去除血污，剪成细小的碎块。按照每50 mg组织加入1 mL裂解液（推荐G2033、G2002）的比例添加，同时加入1-2 μL全能核酸酶。用研磨仪（推荐KZ-III、KZ-III-F、KZ-III-FP）将组织进行研磨，直至充分裂解。组织充分裂解后，室温或冰上孵育5-30 min，收集裂解液，离心后取上清即可进行后续实验。

细菌、真菌样本：细菌或真菌离心收集后，每1 mL裂解液（推荐G2033、G2002）中加入1-2 μL全能核酸酶，然后按照裂解液的使用说明用于细菌或真菌的裂解。室温或冰上孵育5-30 min，收集裂解液，离心后取上清即可进行后续实验。

注：常用的裂解液中含有不同浓度的Triton X-100或NP-40、SDS及脱氧胆酸钠等，这些试剂对全能核酸酶有一定的影响，所以对于不同实验需要适当增加酶量或延长孵育时间。

2. 用于去除重组蛋白中的核酸：推荐反应体系中全能核酸酶的终浓度为90 U/mL，可以降解体系中所有核酸。

3. 用于提高包涵体蛋白复性率：推荐细胞裂解液中全能核酸酶的酶浓度为1 U/mL，可以有效降低由于基因组DNA而粘附的蛋白酶，提高包涵体纯度，最终提高包涵体蛋白的复性率。

注意事项

1. Mg²⁺是全能核酸酶的关键催化辅因子，反应缓冲液含有1-2 mM mg²⁺对全能核酸酶的活性是必须的。

2. 全能核酸酶推荐使用条件见下表。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）